震撼市場的細(xì)胞篩網(wǎng)結(jié)構(gòu)先進(jìn)
更新時(shí)間:2016-05-11 點(diǎn)擊:1460
震撼市場的細(xì)胞篩網(wǎng)結(jié)構(gòu)先進(jìn)
細(xì)胞篩網(wǎng)為獲得單細(xì)胞懸液的工具,與50ml離心管配套使用,分散細(xì)胞團(tuán)塊或原代組織,研究方向?yàn)榱魇郊?xì)胞,微載體與細(xì)胞分離、過濾細(xì)胞,三種網(wǎng)孔徑配合不同類型的樣品使用不同的顏色可區(qū)別不同的孔徑型號(hào),單獨(dú)包裝,γ射線滅菌,根據(jù)不同細(xì)胞培養(yǎng)的需要選擇。
細(xì)胞篩網(wǎng)所有組織培養(yǎng)處理都是使聚苯乙烯具有親水性,且包含各種支持細(xì)胞培養(yǎng)的帶負(fù)電的官能團(tuán)。所有組織培養(yǎng)處理都在一真空室中進(jìn)行*的氣溶膠組織培養(yǎng)表面處理,保證細(xì)胞良好黏附、鋪展和生長,導(dǎo)入了一系列正電荷含氮集團(tuán),以培養(yǎng)更多不同類型的細(xì)胞,某些特殊尤其是眾多的干細(xì)胞或細(xì)胞系細(xì)胞的貼壁和鋪展 疏水性更強(qiáng),能降低細(xì)胞貼壁。細(xì)胞篩網(wǎng)用吸管將稀釋的血液沿離心管壁徐徐加到分離液面上,用力要輕,避免血液沖入分離液中,使得稀釋血重疊在分離液面以上,擰緊管蓋。稀釋血與分離液的高度比在1:2-2:1之間。原則上兩者的總高度不超過離心管的2/3。
將離心管放置于水平離心機(jī)中,室溫下 2000rpm離心20min。離心過程中要觀察離心速度是否正確,且在停止時(shí)選擇“no break”,避免因?yàn)榧眲p速將已經(jīng)分離的單個(gè)核細(xì)胞層重新弄混。注意離心結(jié)束時(shí)的減速過程,不要太快。離心結(jié)束后可見管內(nèi)分為四層,細(xì)胞篩網(wǎng)從上至下分別為:血漿層(含部分血小板)、白膜層(含單個(gè)核細(xì)胞及少量血小板)、分離液層、粒細(xì)胞及紅細(xì)胞層。將吸管輕輕穿過血漿層至白膜層,沿離心管周緣吸出血漿層與分離液層界面間的細(xì)胞篩網(wǎng),置于新離心管中。盡量少吸取分離液。細(xì)胞篩網(wǎng)加吸出體積5倍以上液體,用吸管吹打均勻,避免產(chǎn)生氣泡,液拄高度不要超過離心管的2/3。室溫1500rpm離心10min,快速傾倒出上清液。
細(xì)胞篩網(wǎng)注意吹打均勻,不要有細(xì)胞團(tuán)塊。室溫下1500rpm離心5min,洗滌兩次。zui后一次洗滌時(shí)定量加入RPMI1640,吹打均勻后取樣計(jì)數(shù)細(xì)胞,zui后一次離心完畢傾倒出上清液后請請要度離心管,將管底細(xì)胞搖勻。根據(jù)上一步的計(jì)數(shù)結(jié)果,用含F(xiàn)BS10%-20%、雙抗的RPMI1640培養(yǎng)液將細(xì)胞配成所需濃度。離心速度太慢或時(shí)間不足時(shí),淋巴細(xì)胞層較薄,且在這個(gè)層面上有紅細(xì)胞混雜;離心速度太快或時(shí)間過長時(shí),淋巴細(xì)胞層相對分散,會(huì)進(jìn)入下面的分離液層,每次將離心管帶入超凈臺(tái)內(nèi)時(shí)要用酒精擦拭細(xì)胞篩網(wǎng),尤其管口和管帽。