用中性粒細胞分離液提取中性粒細胞過程
更新時間：2016-07-21 點擊：4219
銷售直線：021-31322331、一、實驗所需材料：
：865512910、
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1、中性粒細胞分離液（histopaque）
2、全血
3、Hanks液
4、離心管若干
5、離心機
6、移液管，移液搶
二、實驗步驟
1. 將所有試劑放至室溫。
2、用離心管收集全血1-2ml
3、加等體積的Hanks液至全血中組成
4、加2ml中性粒細胞分離液至裝至離心管中。
5、將全血和Hanks液加入分離液中
6、4℃，900r/min離心8-10min血液此時應(yīng)該分為6層：血漿、單核細胞層、分離液、中性粒細胞、其余的分離液、紅細胞沉淀層。如果分層不是很明顯，會導(dǎo)致分離的細胞不純，則需要重復(fù)分離。
7、用吸管小心地移去上面的三層（血漿、單核細胞和分離液）
8、小心地吸取中性粒細胞層和其下面的分離液層，轉(zhuǎn)移至一個干凈的離心管中。
9、加Hanks液3ml，后4℃，900r/min離心8-10min，棄上清，留沉淀，重復(fù)2次。
10、如果細胞用來提RNA，可加Trizol 1ml保存。
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