紅細胞裂解液說明書
紅細胞裂解液
Cat NO : NH4CL2009 規(guī)格 ：100 mL
產(chǎn)品簡介： 本裂解液有別于市場上銷售的其它紅細胞裂解液，其配方經(jīng)過本公司優(yōu)化在裂解紅細胞的同時不損傷并在一定程度上保護淋巴細胞(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞，所獲得的細胞可保持完好的生物活性和完整的細胞形態(tài)。另外，本裂解液中無DNA及RNA酶，配合細胞分離液使用所提細胞可廣泛用于細胞培養(yǎng)及分子生物學實驗，請廣大用戶從優(yōu)選擇。 紅細胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)，也稱ACK Lysis Buffer，是一種用于從人或鼠等的血液或組織細胞樣品中裂解并去除無細胞核紅細胞的溶液。 本裂解液不適用于有細胞核紅細胞的裂解，例如鳥或禽類的紅細胞。本裂解液經(jīng)過無菌處理，處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續(xù)的原代培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。 保存條件： 常溫避光保存，有效期一年。 注意事項： 本裂解液為無菌產(chǎn)品，請注意保持無菌，使用本產(chǎn)品時宜在超凈工作臺內(nèi)進行。 如果經(jīng)過紅細胞裂解液處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提取，在處理細胞時不必使用經(jīng)過DEPC處理過的溶液。為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 使用說明： 裂解過程及離心需在4℃的條件下進行。 對于細胞懸液樣品：
1. *次裂解，加入5-8倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
2. 300g離心10min，棄紅色上清。
3. 如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟1、2步進行短時多次裂解。但后續(xù)每次加入的紅細胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時，每次裂解結束，需先加入10ml PBS進行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅細胞裂解*，裂解結束。通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。
4. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，300g離心5min，棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。
5. 根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。
對于血液樣品：
1. 取新鮮抗凝血，400-500g離心5min，離心棄血漿。
2. *次裂解，加入5-8倍細胞體積的紅細胞裂解液，輕輕吹打混勻，裂解2min。
3. 300g離心10min，棄紅色上清，留沉淀。
4. 如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不*，可以重復上述步驟2、3步進行短時多次裂解。但后續(xù)每次
加入的紅細胞裂解液為上一次的一半，但zui少不能低于2ml。裂解液減少到只剩余2ml時，
每次裂解結束，需先加入10ml PBS進行終止，并300g離心10min，棄紅色上清。直至紅
細胞裂解*，裂解結束。通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的一些檢測。
5. 洗滌1-2次：加入適量PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，重懸沉淀，300g離心5min，
棄上清。洗滌液的用量通常應至少為細胞沉淀體積的5倍。
6. 根據(jù)實驗需要用適當溶液重懸細胞沉淀后即可進行計數(shù)等后續(xù)實驗。
注意：對于微量或少量的血液樣品，可以在*步中不進行離心棄上清的操作，直接在第二
步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液，進行裂解。對于鼠的血液，裂解時間稍短，對于人
的外周血，宜延長裂解時間，具體裂解時間需客戶自行摸索，以達到*裂解效果。裂解過
程中宜適當搖動以促進紅細胞裂解。
