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人或各種動(dòng)物外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒分離方法說明及圖例

更新時(shí)間:2013-01-15      4331

 

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備注:本公司銷售的所有產(chǎn)品僅用于生化科研試驗(yàn)

產(chǎn)品名稱 :
 大鼠外周血中性粒細(xì)胞分離液試劑盒
品牌 :
 TBD
貨號(hào) :
 LZS1091
規(guī)格 :
 2X100ml/kit
詳細(xì)信息 :
 
分離方法說明及圖例
A. 取 1ml新鮮抗凝血與E液1:1混合再與1ml的全血及組織稀釋液(Cat#:2010C1119)混
勻置20℃-30℃下自然沉降20-30分鐘。吸取渾濁的上清部分,底部紅細(xì)胞(含大量中性
粒細(xì)胞)備用;
B. 將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A液之液面上(上清液與A液的比例為1:1);
C. 以400g(約1500轉(zhuǎn)/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉(zhuǎn)子);
此時(shí)離心管中由上至下細(xì)胞分四層。*層;為稀釋液(血漿)層。第二層;為環(huán)狀
乳白色單個(gè)核細(xì)胞層。第三層;為混濁分離液層(此層液體中含有一定量中性粒細(xì)胞)。
第四層;極少量紅細(xì)胞層(含一定量中性粒細(xì)胞)。
D. 將步驟A及步驟C中所得紅細(xì)胞層用紅細(xì)胞裂解液裂解并去除紅細(xì)胞獲得大量中性粒細(xì)
胞(詳細(xì)方法請(qǐng)參看“二、紅細(xì)胞裂解液使用說明”)。
E. 收集步驟C中所得第三層混濁分離液及步驟D中所得大量中性粒細(xì)胞放入含細(xì)胞洗滌液
(Cat#:2010X1118)4-5ml的試管中,充分混勻后,以500g(約1800轉(zhuǎn)/分)離心20分鐘,
棄去上清留沉淀細(xì)胞重新懸起。重復(fù)洗滌2次即得所需中性粒細(xì)胞。

  

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