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NK細胞分離試劑盒操作說明

更新時間:2016-07-12      6533

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各種動物外周血和臟器組織NK細胞分離試劑盒操作說明:

 

Store at: RT° C         Size :2X200ml/Kit

試劑盒內容

試劑:全血及組織勻漿稀釋液 200ml

試劑:細胞洗滌液 200ml

試劑B 200ml

試劑D 200ml

試劑E 200ml

說明書 1

 

操作方法(操作全過程應在20-25度環境下進行)

1. 1ml肝素抗凝血與全血及組織勻漿稀釋液(或胎牛血清或人血清懸起勻漿的細胞 1X107/ml11混合后再按2:1的比例與E液混合,20-25℃靜置3分鐘,吸取上層渾濁液,棄去大部分紅細胞。在10ml15ml玻璃離心管中依次小心加入BD兩種液體各1ml,制成梯度界面(液面分層一定清晰)。將吸取的上層渾濁液疊加于D液之液面上,以400g(1500/離心15分鐘(半徑15cm水平轉子),渾濁液與D液間的界面為NK細胞層.(提取率約為80%)。

2.  吸出NK細胞層以細胞洗滌液洗滌三次備用。細胞放入含細胞洗滌液(Cat#2010X11184-5毫升的試管中,充分混勻后,以500g(約1800/分)離心20分鐘。沉淀經反復洗2次即得所需細胞。

分離圖例:

 

注意

TBD 實驗室的細胞分離培養基是敏光型的。這種培養基在運輸和貯藏過程中應避光保溫。由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調節離心轉數,調節離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

 

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10以下易出現白色結晶,影響分離效果。

 

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