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白細胞分離液試劑盒說明書

更新時間:2016-07-12      4473

 

各種動物外周血和臟器組織白細胞分離試劑盒操作說明:

 

Store at: RT°C   Size :200ml/Kit

試劑盒內容:

全血及組織勻漿稀釋液100ml

細胞洗滌液100ml

試劑A 100ml

試劑E 100ml

說明書1

 

操作方法:

A1ml新鮮抗凝血或組織勻漿單細胞懸液(細胞濃度為2×108-1×109/ml,具體制備方法參照“組織單細胞懸液的制備”)與全血及組織勻漿稀釋液(Cat#2010C111911混合再與1mlE混勻置20-25℃下自然沉降30分鐘。吸取渾濁的上清部分,棄去底部紅細胞備用;

B將步驟A中所得的渾濁上清液體小心疊加在A之液面上(上清液與A液的比例為11);

C400g(約1500/分)離心15分鐘(半徑15cm水平轉子);

此時離心管中由上至下細胞分四層。*層:為血漿層。第二層:為環狀乳白色單個核細胞。第三層:為混濁分離液層(此層液體中含有大量白細胞)。第四層:極少量紅細胞層(如無紅細胞層分離效果會更好),收集第二,三層混濁分離液及極少量紅細胞層(如無紅細胞層分離效果會更好)放入含細胞洗滌液Cat#2010X11184-5ml的試管中,充分混勻后,以500g(約1800/分)離心20分鐘,棄去上清留沉淀細胞重新懸起。重復洗滌2次即得所需白細胞。

 

注意

TBD 實驗室的細胞分離培養基是敏光型的。這種培養基在運輸和貯藏過程中應避光保溫。由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調節離心轉數,調節離心的時間,摸索*的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。組織,血液,細胞要求新鮮,避免冷凍和冷藏。

 

貯藏

18-25℃避光保存。啟封后置4℃保存。本品為真空包裝,未啟封前置于10以下易出現白色結晶,影響分離效果。

 

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