微生物藥敏試紙(擴散法<K-B法>)
【產品名稱】通用名稱:微生物藥敏試紙(擴散法<K-B法>)
【包裝規格】10片/瓶、20片/瓶、30片/瓶、50片/瓶
【預期用途】用于體外抗微生物藥物敏感性試驗。
【檢驗原理】藥敏試紙含帶的藥物經溶解向培養基周圍擴散,形成同心圓濃度梯度,在一定
濃度范圍內可抑制敏感菌的生長,形成抑菌環。該抑菌環直徑的大小與該抗菌
藥物的zui低抑菌濃度(MIC)成反比。即通過紙片擴散試驗所測的抑菌環直徑
的大小,并參照《全國臨床檢驗操作規程》或CLSI《抗菌藥物敏感性試驗執行
標準》判斷檢測菌敏感、中介或耐藥情況。
【主要組成成份】直徑為6.0~6.35mm的藥檢紙,含微量抗生素稀釋液。
【儲存條件及有效期】-20~8°C保存,避光密封貯存,有效期為十二個月。
【樣本要求】待測菌應為生長在無選擇性瓊脂平板上的新鮮純菌落。
【檢驗方法】a 冰箱內取出的試紙瓶需放置恒溫后方可打開,防止冷熱水凝結造成紙片受潮。
b 用接種環挑取18~24h培養的新鮮菌落于3~10ml無菌用水內,調制成相當于
0.5麥氏標準的細菌濃度(務必于15min內使用)
c 用無菌棉拭子沾取菌液,并經管壁旋轉擠壓去除過多的菌液,均勻涂抹于MH
培養基表面(培養基厚度約為4mm),以不同角度涂抹3次,然后沿平皿內
緣涂抹一周,蓋上皿蓋,置室溫干燥3~5min后用鑷子將藥敏試紙貼于培養
基面上(9cm的平皿可貼6片)。紙片貼牢后避免再次移動。
d 蓋上蓋子,倒扣置培養箱內孵育(一般為18~24h)后取出。
e 用游標卡尺量取抑菌環直徑,對照判讀標準判讀結果。
【檢驗結果的解釋】
敏感(S):是指菌株能被常規劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。
中介(I):常規劑量在感染部位可達到的濃度,不是敏感性的度量;還可作為
緩沖區,為防止有微小技術因素失控導致的結果偏差。
耐藥(R):是指菌株不能被常規劑量在感染部位可達到的抗菌濃度所抑制。
【檢驗方法的局限性】僅用于體外標本的藥物敏感性試驗。
【注意事項】1冰箱內取出試紙瓶需放置恒溫后方可打開,防止冷熱水凝結使紙片受潮。
2藥敏試驗采用水解酪蛋白(MH)瓊脂,4mm厚度,PH7.2~7.4;對營養要求
高的細菌需另補充微量因子。建議挑取3~5個菌落調制菌液。
3平皿使用時應盡可能除去多余的水份,以免影響抑菌環的擴散。
4培養溫度應控制在35~37°C,堆放平皿不易過高影響受熱均勻。
5測量抑菌環應該仔細,。
6使用后的所有培養物須高壓滅菌處理。
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